Ini adalah jenis khas mikroskop optik medan terang yang mempunyai banyak persamaan dengan mikroskop kontras fasa. Untuk membuat mikroskop medan gelap, letakkan diafragma medan gelap di bawahnya dan buat kon cahaya berongga di bawah pemeluwap yang memasuki objektif hanya dari sampel
Teknik ini digunakan untuk menggambarkan sel hidup yang tidak ternoda. Ini dicapai dengan menerangi sampel kerana apabila rasuk kon berongga dihantar ke sampel, sinar terpesong (tidak terpantul/tidak terbias) tidak melalui objektif, manakala yang tidak terbias (terpantul/terbias ) akan melalui kanta objektif. Cahaya melalui kanta objektif ke spesimen, membentuk imej.
Ini menyebabkan kawasan sekeliling sampel kelihatan hitam dan sampel kelihatan bercahaya. Ini didayakan oleh latar belakang gelap (iaitu mikroskop medan gelap).
Aplikasi Darkfield Microscopy
Ia digunakan untuk menggambarkan organ dalaman sel yang lebih besar seperti sel eukariotik
Kenal pasti sel bakteria dengan bentuk unik, seperti Treponema pallidum (Treponema pallidum).
