Ini adalah omikroskop ptikaldi mana sisihan cahaya kecil, atau peralihan fasa, berlaku semasa penembusan cahaya ke dalam sampel yang tidak tercemar. Anjakan fasa ini diterjemahkan kepada imej, bermakna apabila cahaya melalui sampel legap, anjakan fasa mencerahkan sampel, menghasilkan imej yang diterangi (terang) di latar belakang.
Mikroskopi kontras fasa menghasilkan imej kontras tinggi apabila bekerja dengan spesimen lutsinar, jadi ini benar terutamanya untuk imej kultur mikrob, serpihan tisu nipis, tisu selular dan zarah subselular.
Prinsip di sebalik operasi mikroskopi kontras fasa adalah menggunakan kaedah optik untuk menukar spesimen kepada imej amplitud, yang dilihat melalui kanta mata mikroskop.
PCM boleh digunakan untuk melihat sel yang tidak tercemar (juga dikenali sebagai objek fasa), yang bermaksud bahawa morfologi sel dikekalkan dan sel boleh diperhatikan dalam keadaan semula jadinya, dengan kontras yang tinggi dan kejelasan yang berkesan. Ini kerana jika spesimen diwarnakan dan diperbaiki, ia akan membunuh kebanyakan sel, satu ciri yang tidak dapat dihapuskan oleh mikroskop cahaya medan terang.
Anjakan yang berlaku semasa penembusan cahaya ditukar kepada perubahan amplitud, menyebabkan kontras imej.
Digabungkan dengan unsur penambah kontras (seperti pendarfluor), ia membenarkan persembahan imej spesimen yang lebih baik.
Bahagian mikroskop kontras fasa
Instrumentasi mikroskop kontras fasa adalah berdasarkan laluan cahaya daripada menerima sumber cahaya kepada visualisasi imej.
Oleh itu, urutannya terdiri daripada:
Sumber cahaya (lampu arka merkuri)
pukulan kumpulan
apertur
pemeluwap
Pemeluwap cincin
spesimen
Tujuan
plat foto
cahaya terkutub
cincin fasa
Ciri mikroskop kontras fasa
Perubahan yang disebabkan oleh cahaya terpesong bertaburan (terpesong) dan cahaya tidak terpesong yang mencapai sampel di mana ia diserap dihasilkan pada panjang gelombang tertentu dan mencipta warna. Perbezaan yang disebabkan oleh cahaya berselerak dan cahaya yang diserap dipanggil perubahan amplitud. Perubahan amplitud ini adalah sensitif dan oleh itu tidak dapat divisualisasikan oleh peralatan fotografi seperti mikroskop kontras fasa dan oleh itu boleh dilihat oleh mata manusia.
Pemeluwap mikroskop kontras fasa mempunyai cakera legap yang dipanggil cincin, manakala cincin lutsinar mencipta kon cahaya yang melalui sampel. Apabila cahaya berubah, beberapa cahaya pada sampel dibengkokkan kerana perubahan ketumpatan optik, membentuk imej pada objektif. Cahaya tidak terpesong akan terkena gelang fasa pada plat fasa, manakala cahaya terpesong akan terlepas gelang fasa yang melalui terus melalui plat fasa, membentuk imej.
Mikroskop kontras fasa direka bentuk dengan objektif yang boleh melaksanakan pelbagai fungsi apabila digunakan bersama dengan teknik meningkatkan kontras seperti pendarfluor. Objektif terletak dalam plat fasa dalaman, yang mengubah penyerapan cahaya dan peralihan fasa (iaitu, tidak difraksi), mencipta spektrum luas untuk membezakan sampel dan mencipta kontras yang kuat di latar belakang.
Aplikasi mikroskopi kontras fasa
Tentukan morfologi sel hidup, seperti sel haiwan dan tumbuhan
Kaji motiliti dan struktur pergerakan mikroorganisma
Pengesanan unsur mikrob tertentu seperti endospora bakteria
